마이코톡신 테스터 ELISA 파장 400 - 999nm 아플라톡신 B1 검출 ST-2000A

ST-2000A 마이코톡신 테스터

ST-2000A 마이코톡신 분석기는 아플라톡신 및 효소 면역 흡착 분석에 필수적인 분석 기기입니다. 고체상 효소 면역 흡착 분석(ELISA)의 원리, 즉 효소 면역 흡착 분석(ELISA)은 이 기기와 B1 키트로 구성되며, 샘플 내 아플라톡신 B1 및 기타 마이코톡신의 함량을 제한적이고 정량적으로 결정하는 데 사용할 수 있습니다(다른 키트가 장착된 경우 다른 독소를 감지할 수 있음). 식품, 사료, 오일, 유제품, 의약품, 음료, 와인 및 기타 제품에서 아플라톡신 B1 및 기타 마이코톡신 검출에 널리 사용됩니다.

성능 특성:

1. 디스플레이 작동: 컬러 LCD 화면, 비디오폰 분배 보드, 전체 보드 정보 표시, 터치 스크린 작동

2. 진동 플레이트 기능: 레벨 3 진동 플레이트 속도, 시간 0-255초 조절 가능

3. 워크스테이션: 500개 그룹의 프로그램, 100,000개의 샘플 결과 저장 가능, 흡광도, 선형 방정식, 로그 방정식, 이차 방정식, 삼차 방정식, 흡광도 백분율-농도 로그 방정식, 스플라인 함수, 억제율 등 풍부한 계산 모드 제공하는 전문 효소 마커 소프트웨어

기술 매개변수:

1 원리 및 응용

이 키트는 간접 경쟁 ELISA 방법을 사용하여 곡물, 사료 및 기타 샘플에서 아플라톡신 B1(AFB1)을 검출합니다. 이 키트는 커플링 항원으로 사전 코팅된 효소 표지 플레이트, 호스래디시 효소 마커, 항체, 표준 및 기타 일치하는 시약으로 구성됩니다. 테스트 중 표준 또는 샘플 용액을 첨가하면 샘플의 아플라톡신 B1과 효소 플레이트가 항-아플라톡신 B1 항체와 경쟁하기 위해 사전 코팅된 컨쥬게이트 항원이 됩니다. 효소 마커를 첨가한 후 TMB 기질을 사용하여 발색합니다. 샘플 흡광도 값은 샘플에 포함된 아플라톡신 B1 함량과 음의 상관 관계가 있습니다. 샘플의 아플라톡신 B1 잔류량은 표준 곡선과 비교하여 얻을 수 있습니다.

2 기술 지표

2.1 키트 민감도: 0.03ppb (ng/ml)

2.2 반응 모드: 25 ℃, 30분~15분

2.3 최소 검출 한계:

곡물...................................................... 0.15ppb

배합 사료.......................................... 0.3 ppb

식용유, 땅콩.................................... 0.6ppb

간장, 밀 및 기타 사료.............................. 0.3 ppb

맥주.......................................... 0.3 ppb

와인, 간장, 식초.................................... 0.15ppb

2.4 교차 반응률:

아플라톡신 B1 100%

2.5 샘플 회수율:

곡물 및 배합 사료.............................. 85% ± 15%

땅콩.................................... 82 ± 15%

식용유.................................... 85 ± 15%

간장, 밀 및 기타 사료.............................. 83 ± 15%

맥주.................................... 84 ± 15%

와인, 간장, 식초............ 87 ± 15%

3 키트 구성

효소 마커 플레이트.................................... 96개 홀

표준 용액 (검은색 캡): 각 1ml

0ppb,0.03ppb,0.06ppb,0.12ppb,0.24ppb,0.48ppb

고표준 용액: 100ppb.............................. 1ml

효소 마커 (빨간색 캡).............................. 5.5ml

항체 작업 용액 (파란색 캡).............................. 5.5ml

기질 용액 A (흰색 캡).............................. 6ml

기질 용액 B (검은색 캡).............................. 6ml

종결 용액 (노란색 캡).............................. 6ml

20X 농축 세척 용액 (흰색 캡)..................... 40ml

사용 설명서.....................1부

4 필요한 장비 및 시약

4.1 기기: 아플라톡신 테스터, 프린터, 균질기, 질소 건조 장치, 진동기, 원심 분리기, 눈금 피펫, 저울 (감도 0.01g)

4.2 마이크로 피펫: 단일 채널 20 µ l-200 µ l, 100 µ l-1000 µ l, 다중 채널 300 µ l

4.3 시약: 메탄올, n-헥산, 트리클로로메탄 또는 디클로로메탄

5 샘플 전처리

5.1 샘플 처리 전 지침:

실험 기기는 깨끗해야 하며 오염 및 실험 결과 간섭을 피하기 위해 일회용 흡입구를 사용해야 합니다.

5.2 용액 준비:

용액 1: 샘플 추출물

70% 메탄올, 즉 V 메탄올: V 탈이온수=7:3.

5.3 샘플 전처리 단계:

5.3.1 곡물 처리 방법

1) 분쇄된 샘플 2g을 50ml 원심 분리 튜브에 넣고 샘플 추출 용액 5ml을 첨가한 후 5분간 흔들고, 실온에서 4000 rpm/10분간 원심 분리;

2) 상등액 0.5ml을 취하여 탈이온수 0.5ml을 첨가하고 잘 섞습니다;

3) 50 μ L 분석을 취합니다.

샘플 희석 비율: 5 최소 검출 한계: 0.15ppb

5.3.2 옥수수 껍질 및 밀기울과 같이 수분 흡수율이 높은 샘플 처리 방법

1) 분쇄된 샘플 2g을 50ml 원심 분리 튜브에 넣고 샘플 추출 용액 20ml을 첨가한 후 5분간 흔들고, 실온에서 4000 rpm/10분간 원심 분리;

2) 상등액 0.5ml을 취하여 탈이온수 0.5ml을 첨가하고 잘 섞습니다. (독소 함량이 극도로 높은 샘플의 경우 35% 메탄올로 희석한 후 테스트할 수 있습니다. 예를 들어, 2)의 혼합 용액 0.1ml과 35% 메탄올 0.9ml을 취하여 혼합합니다. 최종 샘플 희석 비율은 200이며, 검출 한계는 6ppb입니다.)

3) 50 μ L 분석을 취합니다.

샘플 희석 비율: 20 최소 검출 한계: 0.6ppb

참고: 샘플 내 독소 분포가 불균일하므로 여러 지점에서 샘플을 채취하고 완전히 혼합한 후 2g을 채취하여 테스트해야 합니다.

5.3.3 배합 사료 처리 방법

1) 분쇄된 샘플 2g을 50ml 원심 분리 튜브에 넣고 샘플 추출 용액 10ml을 첨가한 후 5분간 흔들고, 실온에서 4000 rpm/10분간 원심 분리;

2) 상등액 0.5ml을 취하여 탈이온수 0.5ml을 첨가하고 잘 섞습니다;

3) 50 μ L 분석을 취합니다.

샘플 희석 비율: 10 최소 검출 한계: 0.3ppb

5.3.4 식용유, 땅콩 및 고지방 샘플 처리 방법

1) 분쇄된 샘플 2g을 50ml 원심 분리 튜브에 넣고 n-헥산 8ml과 샘플 추출 용액 10ml을 첨가한 후 5분간 흔들고, 실온에서 4000 rpm/10분간 원심 분리;

2) 상층액을 제거하고 하층액 0.5ml을 취하여 탈이온수 0.5ml을 첨가하고 잘 섞은 후, 혼합액 0.5ml을 취하여 35% 메탄올 0.5ml을 첨가하고 30초간 흔듭니다;

3) 50 μ L 분석을 취합니다.

샘플 희석 비율: 20 최소 검출 한계: 0.6ppb

5.3.5 소스, 밀, 비스킷, 페이스트리 등 식품 또는 조미료 및 사료 농축물과 같은 사료 처리 방법

1) 분쇄된 샘플 2g을 50ml 원심 분리 튜브에 넣고 샘플 추출 용액 10ml을 첨가한 후 5분간 흔들고, 실온에서 4000 rpm/10분간 원심 분리;

2) 상등액 2ml을 취하여 트리클로로메탄(또는 디클로로메탄) 4ml을 첨가하고 5분간 흔들고, 실온에서 4000 rpm/10분간 원심 분리;

3) 상층액을 다른 용기에 옮기고 하층액은 보관합니다. 상층액에 클로로포름(또는 디클로로메탄) 4ml을 추가로 첨가하고 5분간 완전히 흔들어 혼합한 후, 실온에서 4000 rpm/10분간 원심 분리합니다;

4) 상층액을 제거하고 두 번의 하층액을 합쳐 완전히 혼합합니다;

5) 합쳐진 하층액 2ml을 취하여 50-60 ℃ 질소 하에서 건조시킵니다;

6) 샘플 추출물 0.5ml을 첨가하여 건조된 물질을 완전히 용해시킨 후, 탈이온수 0.5ml을 첨가하여 혼합합니다;

7) 50 μ L 분석을 취합니다.

샘플 희석 비율: 10 최소 검출 한계: 0.3ppb

5.3.6 맥주 처리 방법

1) 맥주를 완전히 휘저어(CO2 제거) 맥주 샘플 2ml을 취하고 증류수 1ml을 첨가한 후 메탄올 7ml을 첨가하고 5분간 흔듭니다;

2) 혼합 샘플 용액 0.5ml을 취하여 탈이온수 0.5ml을 첨가하고 잘 섞습니다;

3) 50 μ L 분석을 취합니다.

샘플 희석 비율: 10 최소 검출 한계: 0.3ppb

5.3.7 와인, 간장 및 식초 처리 방법

1) 샘플 2ml을 취하고 증류수 2ml을 첨가한 후 트리클로로메탄(또는 디클로로메탄) 10ml을 첨가하고 5분간 흔들고, 실온에서 4000 rpm/10분간 원심 분리;

2) 하층액 1ml을 취하여 50-60 ℃ 질소 하에서 건조시킵니다;

3) 샘플 추출물 0.5ml을 첨가하여 건조된 물질을 완전히 용해시킨 후, 탈이온수 0.5ml을 첨가하고 잘 섞습니다;

5) 50 μ L 분석을 취합니다.

샘플 희석 비율: 5 최소 검출 한계: 0.15ppb

6 ELISA 단계

4 ℃ 냉장 보관 환경에서 필요한 시약을 꺼내 실온에서 30분 이상 보관합니다. 세척 용액이 냉장 보관되어 결정이 생긴 경우 실온에서 완전히 용해시켜야 합니다. 각 액체 시약은 사용 전에 흔들어야 합니다. 필요한 수의 마이크로 플레이트와 프레임을 꺼내고, 사용하지 않은 마이크로 플레이트는 자가 밀봉 백에 넣어 2-8 ℃에 보관합니다.

실험 전에 20 × 농축 세척 용액을 20배 희석하여 작업 세척 용액으로 만듭니다.

6.1 번호 매기기: 샘플 및 표준의 해당 홀에 순서대로 번호를 매기고, 각 샘플 및 표준에 대해 두 개의 평행 홀을 만들고, 표준 홀 및 샘플 홀의 위치를 기록합니다.

6.2 샘플 첨가 반응: 각 홀에 표준 또는 샘플 50 µ l/홀을 첨가한 후, 효소 마커 50 µ l/홀을 첨가하고, 항체 작업 용액 50 µ l/홀을 첨가합니다. 플레이트를 커버 플레이트 막으로 밀봉하고, 5초간 부드럽게 흔들어 혼합한 후, 25 ℃에서 30분간 반응시킵니다.

6.3 세척: 커버 플레이트 막을 조심스럽게 제거하고, 홀의 액체를 건조시킨 후, 작업 세척 용액 250 µ l/홀로 5회 완전히 세척합니다. 각 세척 사이에는 30초의 간격을 두고, 흡수지(패트 후 제거되지 않은 기포는 깨끗한 건 총으로 찌를 수 있음)로 두드려 건조시킵니다.

6.4 발색: 각 홀에 기질 용액 A 50 µ l와 기질 용액 B 50 µ l를 첨가하고, 5초간 부드럽게 흔들어 잘 혼합한 후, 25 ℃에서 15분간 암소에서 발색시킵니다.

6.5 종결: 각 홀에 종결 용액 50 µ l를 첨가하고, 부드럽게 흔들어 잘 혼합하여 반응을 종결시킵니다.

6.6 흡광도 측정: 아플라톡신 테스터를 사용하여 450 nm에서 각 홀의 흡광도 값을 측정합니다(이중 파장 450/630 nm 권장). 측정은 반응 종결 후 10분 이내에 완료해야 합니다.

6.7 ST-2000A 자동 아플라톡신 테스터는 자동으로 측정을 완료하고 자동으로 결과를 생성합니다.